5640是一列开往黔东南州春天的列车，是全国首列扶贫列车。电影围绕这列绿皮火车展开，通过几个主人公跌宕起伏又不乏啼笑皆非的创业故事，表现了黔东南人民脱贫致富的美好愿望与奋斗决心……
故事围绕南俪、夏君山和女儿夏欢欢、儿子夏超超，田雨岚、颜鹏和儿子颜子悠等多个家庭展开。儿女们即将从小学升入初中，每个家庭都在面临种种变化，亲子关系也在不断沟通与选择中得到新的认知，父母与孩子迎来共同成长。
故事开始于六年前，简安桀（王子文饰）在一次意外中犯下了无法挽回的错误，之后，她离开了家来到法国，在这六年间，简安桀的内心里都充满了悔恨和怨恨，悔恨自己当初做过的事情，怨恨不肯原谅她的家人。实际上，席郗辰（贾乃亮饰）一直在默默关注和帮助着简安桀。一场事故中，简安桀的眼睛和手受到了严重的伤害，失去了光明。在医院里，一个名为艾维斯的护工负责照顾她，艾维斯的温柔和耐心渐渐融化了简安桀内心里的坚冰，在他的精心照料下，简安桀渐渐恢复了健康，然而，当她想要看一看艾维斯的样貌时，后者却消失了。
一百年前，渔牙三大舵主和渔牙老祖意外捕获人鱼，为求长生食其鱼肉，被人鱼诅咒，渔牙后人皆活不过三十，每到月圆之夜前后，万蚁噬骨，疼痛难忍。渔牙三大舵主和渔牙老祖在临终前终于寻得破解之法，需用人鱼眼珠所化龙泉珠根治，只不过龙泉珠需要培育。民国十二年，渔牙白龙王、紫金龙王、赤青龙王出海寻找渔牙老祖留下的龙泉珠线索，被海盗偷袭白龙王失踪，赤青龙王战死，紫金龙王归隐大陆，白龙王夫人龙嫂召集渔牙老祖后人郑明和寻得龙泉珠线索，和白龙王妹妹林静茹一起踏上大陆寻找龙泉珠。
女主许灵运为报复闺蜜白流苏，嫁给男主傅廷昀，成为闺蜜小姨妈，在情感与事业上实现双向逆袭。
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